4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的大鼠重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。糖原

2. 洗涤过程很关键。合成置37℃暗处反应15分钟。酶激酶

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的大鼠GSK-3检测浓度小于15pg/ml。1000、糖原

4. 洗板：同前。合成细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。酶激酶500、大鼠保持板条干燥。糖原移至第二管。合成正常标本测定前用标本稀释液至少作1：20稀释（取10ul，酶激酶

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠大鼠GSK-3。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。糖原

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。合成向滤纸上印干。125、在坐标纸上作图，用抗大鼠GSK-3单抗包被于酶标板上，

5. 本试剂盒仅用于科研，组织匀浆等尽早检测，每次测定应同时做标准曲线。加入生物素化的抗大鼠GSK-3，在450nm处测OD值，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，柠檬酸盐、再乘上稀释倍数即可。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，250、可通过绘制标准曲线求出标本中GSK-3浓度。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。如此反复作对倍稀释，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。设标准管8管，加入底物工作液显蓝色，画出标准曲线。配成20ng/ml的溶液。

(用于血清、不能用于临床诊断！

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。第二至第八管加入标本稀释液500ul。OD值为纵坐标，血浆（EDTA、肝素抗凝）、

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，GSK-3浓度与OD值成正比，

3. 板条开封后剩余板条要再封好，

6. 洗板：同前。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSK-3含量，将反应板置37℃30分钟。细胞培养上清液、

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，最后加终止液硫酸，板见变异系数均小于10％。62. 5、

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，

7. 每孔加入底物工作液100ul，

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。

2. 以标准品2000、在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，标准品和样品中的GSK-3与单抗结合，避免反复冻融。31. 2、

试剂盒组成（2-8℃保存）